冬虫夏草的配方简介

时间:2009-10-22 |来源:三九中医药网 收集整理|点击:


  冬虫夏草是一种真菌,它主要寄生于活动的昆虫体内进行有机质的分解碳源、氮源和无机盐内等营养物质。人工栽培时必须合理地配制这类营养成份,才能满足它的生长要求。现筛选了以下几种最适宜冬虫夏草菌丝生长的原料及配方如下:

   一、母种制作 培养基配方:

  1、马玲薯200克(煮汁)、葡萄糖20克、琼脂20克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁1克、蛋白胨1克、牛肉膏0.5克、水1000ml。

  2、蛋白胨1克、葡萄糖20克、酵母膏1克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁1克、VB11克、VB121克、琼脂20克、 水1000ml。

  3、豆芽500克(煮汁)、白糖20克、琼脂20克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁1克、蛋白胨0.5克、水1000ml。将上述配方任选一组,按其它母种制作常规方法操作,分装于180×18试管的1/5,高压灭菌1.5磅维持30分钟,制成斜面培养基备用。

  接种:待斜面培养基表面余水干后,放入无菌接种箱内接种,将分离的纯冬虫夏草母种挑取黄豆大一块放入斜面培养基上,每支母种可接10~15支,但母种的传代不超过二次,否则失去感染力。

  培养:接种后,放置15~18℃条件下恒温培养。三天后菌丝开始萌发,淡黄色而旺盛的绒毛团菌丝向四周蔓廷,七天左右菌丝表面可产生子座(即草),这种草虽然没有虫的寄主,它的营养成份与冬虫夏草完全一致,正常情况下10天左右菌丝可长满斜面培养基。

  二、液体种制作 培养基配方:

  1、米汤(大米煮至半熟过滤)500ml、葡萄糖5克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁1克、蛋白胨1克、牛肉膏1克、 VB11克、VB121克 。

  2、面汤(煮面条后的汤)500ml、白糖5克、蛋白胨1克、牛肉膏1克、硫酸镁1克、酵母膏1克、 磷酸二氢钾1克 。

  3、清泉水500ml、葡萄糖10克、蛋白胨2克、牛肉膏2克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁2克、 VB12克、VB122克 。 将配好的营养液装入500ml的三角瓶内,每瓶装150ml,瓶口塞上棉塞,高压灭菌1.5磅30分钟。 接种培养:冷却后,放入接种箱内无菌操作,将母种培养基取手指头大一块放入液体瓶中,每支母种可接5-10瓶,置20~25℃条件下先静置培养三天,然后再同样温度下放入摇床振动培养,若没有摇床,每天把液体瓶用手摇3-5次,每次3-5分钟,经过10-15天的培养即成为液体种。 如果栽培量大,液体种不够的情况下,应根据生产量还可将液体种扩制液体种2-3次(级),无论哪级液体种都可用于直接栽培冬虫夏草,但母种或液体种传代过多会影响效果。液体种不宜存放时间过长,一般在低温或避光条件下不超过一个月使用效果较好,最好是在栽培季节前制作液体种。

  检验液体种是否培养成功:

  方法是经过10-15天恒温和振动培养,从色泽上看没有明显变化,只有在停止振动三天后,液体表面逐渐出现黄白色菌丝,无任何异色现象,可证明液体种已培养成功,随着时间长久液体表面形成一层很厚的菌皮,在栽培使用时必须去掉表面这层过厚的菌皮利用清液。

  三、固体菌种制作

  冬虫夏草的栽培一般是使用液体菌种,固体菌种还可以试测虫草子座能否生长,也可以用固体培养基或PDA培养基直接栽出虫草,它在大米等固体培养基上或桑蚕上都能长出子座,在适宜的昆虫体上喷入液体种就能长出冬虫夏草。

  培养基配方

  1、将大米用水煮至半生过滤,装入罐头瓶内,用牛皮纸或塑料薄膜封口灭菌。

  2、活玉米或活小麦直接装入罐头瓶内(若干品必须浸泡12小时以上)封口灭菌。

  3、棉壳95%、米粉3%、黄豆粉2%、含水量60%,装瓶灭菌。在1.5磅压力下60分钟,或常压灭菌100℃保持5-6小时,冷却接种。

  接种:在接种箱内无菌操作,无论固体母种或液体种都可接入固体培养基。母种可挑取培养基手指头大一块放在固体培养基表面,也可以用接种针沾取菌丝在固体培养基中搅拌均匀。液体种接种是将种液渗入固体培养基中摇匀,每瓶用种量不超过5ml。

  培养:固体种需在15~18℃的暗光条件下培养,用液体种接的只需15-20天菌丝可长满瓶,用固体母种接的需要一个月时间菌丝才能长满瓶。