葡萄球菌皮肤烫伤样综合征( staphylococcalscalded sk in syndrom e， SSSS) 是由金黄色葡萄球菌产生的表皮剥脱毒素引起， 主要发生于婴幼儿的严重感染， 该病来势凶猛， 若不及时治疗预后不良。所以， 早期、快速、准确的诊断， 对缩短病程、降低患儿死亡率具有重要意义。
1 材料与方法
1. 1 研究对象 1999 年3 月至2001 年2 月临床诊断为SSSS， 未用过抗生素及其他药物的患者共34 例， 男性18 例， 女性16 例， 年龄14 d～ 12 岁，平均5. 21 岁; 37 例脓疱疮患者和11 例非金黄色葡萄球菌型中毒性表皮坏死松解症患者。
1. 2 标本采集 SSSS 患者取原发皮损的渗液或痂皮、水疱液各1. 5 m l; 脓疱疮患者取原发皮损的脓液或痂皮; 非金黄色葡萄球菌型中毒性表皮坏死松解症患者取水疱液各1. 5 m l。标本均取2 份，其中一份直接接种于肉汤培养基中， 用于EL ISA 检测毒素， 另一份用于PCR。
1. 3 引 物 选取编码剥脱毒素A (ETA )、剥脱毒素B (ETB ) 蛋白的基因剥脱毒素A 基因(eta )、剥脱毒素B 基因(etb) 的特定核苷酸序列为引物， 由上海生工生物工程公司合成并纯化。引物1， 5′2 CTA TTTACTGTA GGA GCTA G - 3′， 引物2， 5′2 A TTTA TTTGA TGCTCTCTA T23′， 引物1和引物2 特异性扩增片段长度为741 bp ， 用于检测eta; 引物3， 5′2 A TACACACA TTACGGA TAA T23′， 引物4， 5′2 CAAA GTGTCTCCAAAA GTA T23′， 引物3 和引物4 特异性扩增片段长度为629 bp ，用于检测etb。
1. 4 标本DNA 的提取及PCR 扩增 提取摸板DNA ， PCR 循环参数： 首先95℃变性5 m in， 然后94℃变性30 s， 退火55℃ 30 s， 延伸72℃ 40 s， 扩增30 个循环， 最后72℃延伸5m in。扩增产物在2%琼脂糖凝胶(含0. 5 m g·L - 1溴化乙锭) 上电泳， 在暗箱式紫外检测分析仪内观测， 通过凝胶成像仪储存于电脑中。
2 结 果
共检测34 例SSSS 患者标本， 采用PCR 方法检测SSSS 原发皮损中的eta、etb、eta 和etb 阳性结果分别为21 例(61. 76% )、7 例(20. 58%) 和4 例(11. 76) ; 应用EL ISA 方法检测标本培养分离菌株ETA、ETB、ETA 和ETB 阳性结果分别为10 例(29. 41% )、4 例(11. 76% ) 和1 例(2. 94%)。经统计学处理差异有显著性(P
