拼音名：ⅡXing Shenzonghezheng Chuxuere Miehuoyimiao
英文名：Haemorrhagic Fever With RenaI Syndrome (TypeⅡ)Vaccine，InactiVated
书页号：2005年版三部- 83
本品系用Ⅱ型肾综合征出血热(简称Ⅱ型出血热)病毒接种原代地鼠肾细胞，经培养、收获病毒液、灭活病毒，加入氢氧化铝佐剂制成。用于预防Ⅱ型肾综合征出血热。
1 基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
2 制造
2.1 生产用细胞
生产用细胞为原代地鼠肾细胞。
2.1.1 细胞管理及检定
应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”规定。
2.1.2 细胞制备
选用2周龄左右地鼠，无菌取肾，剪碎，经胰蛋白酶消化，分散细胞，接种培养瓶，加入适宜的培养液，置37％培养。
2.2 毒种
2.2.1 名称及来源
生产用毒种为Ⅱ型出血热病毒L〈［99］〉株。
2.2.2 种子批的建立
应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。
在原代地鼠肾细胞上传代制备主种子批。原始种子批应不超过第13代，主种子批应不超过第16代，工作种子批应不超过第20代。
2.2.3 种子批毒种的检定
主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行2.2.3.1～2.2.3.4项检定。
2.2.3.1 鉴别试验
毒种与已知同型出血热病毒免疫血清等量混合，置37℃水浴90分钟，接种Vero-E〈［6］〉细胞，观察10～14天，以免疫荧光法测定，中和指数应大于1000。
2.2.3.2 病毒滴定
毒种用原代地鼠肾细胞进行免疫荧光法测定，病毒滴度应不低于7.0lgCCID〈［50］〉/ml。
2.2.3.3 无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
2.2.3.4 支原体检查
依法检杏(附录ⅫB)，应符合规定。
2.2.3.5 病毒外源因子检查
依法检查(附录Ⅻc)，应符合规定。
2.2.3.6 免疫原性检查
取主种子批毒种制备原疫苗，接种2kg左右的白色家兔4只，每只后腿肌内注射1.0ml，注射后第1 4天以同法再注射1次。第1次免疫后4周采血分离血清，用蚀斑减少中和试验测中和抗体，试验用病毒为UR株；同时用参考血清作对照，每只家兔的中和抗体滴度应不低于1：10。
2.2.4 毒种保存
毒种应于-60℃以下保存，液体工作种了批毒种保存时间不得超过1年。
2.3 原液
2.3.1 细胞制备
同2.1.2项。
2.3.2 培养液
培养液为含适量灭能小牛血清和乳蛋白水解物的Earle※s液或其他适宜培养液。小牛血清的质量应符合要求(附录ⅫD)。
2.3.3 对照细胞病毒外源因子检查
依法检查(附录Ⅻc)，应符合规定。
2.3.4 病毒接种和培养
选择生长良好的单层细胞，接种适量病毒，在适宜温度培养适当时间后，弃去培养液，换以维持液继续培养一定时间。
2.3.5 病毒收获
培养适宜天数，收获培养液，即为病毒收获液。
2.3.6 病毒收获液检定
按3.1项进行。
2.3.7 病毒灭活
病毒收获液中按1：4000的比例加入甲醛溶液，置适宜温度一定时间内灭活病毒。
2.3.8 合并
合并检定合格的灭活病毒收获液，经离心处理后，加入终浓度不高于0.10mg/ml的硫柳汞作为防腐剂，即为原液。
2.3.9 原液检定
按3.2项进行。
2.4 半成品
2.4.1 配制
检定合格的原液加入终浓度不高于0.70mg/ml的氧氧化铝佐剂，即为半成品。
2.4.2 半成品检定
按3.3项进行。
2.5 成品
2.5.1 分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.5.2 分装
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
2.5.3 规格
每瓶1.0ml。每1次人用剂量为1.0ml。
2.5.4 包装
应符合“生物制品包装规程”规定。
3 检定
3.1 病毒收获液检定
3.1.1 病毒滴定
将本品10倍系列稀释，取至少3个稀释度，分别接种原代地鼠肾细胞或其他适宜细胞，在适宜温度下培养10～12天，以免疫荧光法测定病毒滴度，应不低于6.5 lg CCID〈［50］〉／m1。
3.1.2无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
3.1.3 支原体检查
依法检查(附录ⅫB)应符合规定。
3.2 原液检定
3.2.1 病毒灭活验证试验
按灭活后病毒收获液总量的0.1％取样，透析后接种Vero-E〈［6］〉细胞，连续传3代，每10～14天传1代，每代以免疫荧光法检查病毒，结果均应阴性。
3.2.2 抗原量测定
采用酶联免疫法进行抗原量测定。应不低于1：64。
3.2.3 牛血清白蛋白残留量
采用酶联免疫法，牛血清白蛋白残留量应不高于50ng／剂。
3.2.4 无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
3.3 半成品检定
无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
3.4 成品检定
3.4.1 鉴别试验
按2.2.3.6项进行，应符合规定。效价测定不合格时，鉴别试验不成立。
3.4.2 外观
应为橘红色浑浊液体，久置形成可摇散的沉淀，无异物。
3.4.3 化学检定
3.4.3.1 pH值
应为7.2～8.0(附录V A)。
3.4.3.2 硫柳汞含量
应不高于0.10mg／ml(附录ⅦB)。
3.4.3.3 氢氧化铝含量
应不高于0.70mg／ml(附录ⅦF)。
3.4.3.4 游离甲醛含量
应不高于0.50mg/ml(附录ⅥL)。
3.4.4 效价测定
按2.2.3.6项进行。免疫1只家兔，每只家兔的中和抗体滴度应不低于l：10。
3.4.5 热稳定性试验
疫苗出厂前应进行热稳定性试验。于37℃放置7天，按2.2.3.6项进行效价测定。如合格，视为效价检测合格。
3.4.6 无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
3.4.7 细菌内毒素检查
应不高于100EU／剂(附录ⅫE凝胶限量试验)。
3.4.8 异常毒性检查
依法检查(附录ⅫF)，应符合规定。
4 保存、运输及有效期
于2～8℃避光保存和运输。自效价测定合格之日起，有效期为1年6个月。
5 使用说明
Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗使用说明
【药品名称】
通用名称：Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗
英文名称：Haemorrhagic Fever With Renal Syndrome(TypeⅡ)Vaccine，Inactivated
汉语拼音：ⅡXing Shenzonghezheng Chuxuere Mie huoyimiao
【成分和性状】本品系用Ⅱ型肾综合征出血热病毒接种原代地鼠肾细胞，经培养、收获病毒液、灭活病毒，加入氢氧化铝佐剂制成。为橘红色微浑浊液体．含硫柳汞防腐剂。
【接种对象】肾综合征出血热疫区的居民及进入该区的人员，主要对象为16～60岁的高危人群。
【作用与用途】接种本疫苗后，可刺激机体产生抗Ⅱ型肾综合征出血热病毒的免疫力。用于预防Ⅱ型肾综合征出血热。
【规格】每瓶1.0ml。每1次人用剂量为1.0ml。
【用法用量】(1)于上臂外侧三角肌肌内注射。
(2)基础免疫3针，于第0天、第14天、第28天各注射1次，基础免疫后1年应加强免疫1针，每1次1.0ml。
【不良反应】注射后个别有发热、头晕、皮疹者应注意观察，必要时给予适当治疗。因疫苗含有氢氧化铝佐剂，少数人在注射后局部可出现硬结、轻度肿胀和疼痛，一般在1～3天内自行消退。
【禁忌】(1)发热，患急性疾病、严重慢性疾病、神经系统疾病者。
(2)患过敏性疾病、对抗生素或生物制品有过敏史者。
(3)哺乳期、妊娠期妇女。
【注意事项】(1)注射前应充分摇匀。
(2)疫苗浑浊、变色、有异物及摇不散的块状物或疫苗瓶有裂纹者，均不得使用。
(3)应备有肾上腺素等药物，以备偶有发生严重过敏反应时急救用。接受注射者在注射后应在现场休息片刻。
(4)严禁冻结。
【贮藏】于2～8℃避光保存和运输。
【包装】
【有效期】
【执行标准】
【批准文号】
【生产企业】
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