药典2000版-抑肽酶

时间：2009-10-28 |来源：三九中医药网 收集整理|点击：次


    拼音名：Yitaimei
    英文名：Aprotinin
    书页号：2000年版二部－280
    
　　本品系自牛胰或肺中提取、纯化制得的肽酶抑制剂。按干燥品计算，每1mg的效价不得少于3.0单位。

    【性状】　本品为白色或微黄色粉末。
　　本品在水或0.9％氯化钠溶液中易溶，在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。

    【鉴别】　取本品与胰蛋白酶，分别加水制成每1ml 中含1mg 的溶液，各取10μl置点滴板上，混匀后，加对甲苯磺酰－Ｌ－精氨酸甲酯盐酸盐试液0.2ml ，放置数分钟后，应不显紫红色。以胰蛋白酶溶液10μl 作对照，同法操作，应显紫红色。

    【检查】　酸度　取本品，加水制成每1ml 中含5mg 的溶液，依法测定（附录Ⅵ H），pH值应为5.0 ～7.0 。
　　溶液的澄清度　取本品，加水制成每1ml 中含2mg 的溶液，溶液应澄清。
　　吸收度　取本品，加水制成每1ml中含3.0单位的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在277nm的波长处有最大吸收，吸收度不得过0.8。
　　水分　取本品，照水分测定法（附录Ⅷ　M第一法A）测定，含水分不得过6.0％。
　　高分子蛋白质　取本品适量，用3mol/L醋酸溶液制成每1ml中含300单位的溶液，作为供试品溶液，照柱色谱法（附录Ⅴ C），用葡聚糖凝胶G－50(超细型)约50g为吸收附剂；色谱柱长80～100cm，内径2.5cm；洗脱液为3mol／L醋酸溶液；检测波长为277nm；流速为每小时22～25ml，供试品溶液加入量为1.0ml。主峰前洗脱出的杂质峰之和应不大于所有洗脱峰总面积的3.0％。
　　热原　取本品，加灭菌注射用水或氯化钠注射液制成每1ml 中含15单位的溶液，依法检查（附录Ⅺ D），剂量按家兔体重每1kg 注射1ml ，应符合规定。
　　 异常毒性　　取本品，加灭菌注射用水或氯化钠注射制成每1ml中含4单位的溶液，依法检查（附录Ⅺ　C），按静脉注射法给药，应符合规定。
　　 降压物质　 取本品，加氯化钠注射液溶解并稀释，依法检查（附录Ⅺ　G），剂量按猫体重每1kg注射1.5单位，应符合规定。

    【效价测定】　底物溶液的制备　取N-苯甲酰-L- 精氨酸乙酯盐酸盐171.3mg ，加水溶解并稀释至25ml。临用时配制。
　　胰蛋白酶溶液的制备　取胰蛋白酶对照品适量，精密称定，用盐酸滴定液(0.001mol/L)制成每1ml 中约含0.8单位溶液（约每1ml中含1mg ）的溶液，临用时配制并置于冰浴中。
　　胰蛋白酶稀释溶液的制备　精密量取上述胰蛋白酶溶液1ml ，用硼砂氯化钙缓冲液（pH8.0 ）稀释成20ml，室温放置10分钟，置冰浴中。
　　供试品溶液的制备　精密称取本品适量，加硼砂－氯化钙缓冲液（pH8.0 ）制成每1ml 中约含1.67单位（约每1ml 中含0.6mg ）的溶液，精密量取0.5ml 与胰蛋白酶溶液2ml,再用硼砂-氯化钙缓冲液（pH8.0 ）稀释成20ml，反应10分钟，置冰浴中（2小时内使用）。
　　测定法　取硼砂－氯化钙缓冲液（pH8.0 ）9.0ml 与底物溶液1.0ml 置25ml烧杯中，于25℃±0.5℃恒温水浴中放置3～5分钟，在搅拌下滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)调节pH值为8.0 ，精密加入供试品溶液（经25℃保温3～5分钟）1ml， 并立即计时，用1ml微量滴定管以氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定释放出的酸，使溶液的pH值始终维持在7.9～8.1 。每隔60秒读取pH值恰为8.0 时所消耗的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)的容积（ml），共6分钟。另精密量取胰蛋白酶稀释液1ml ，按上法操作，作为对照（重复一次）。以时间为横坐标，消耗的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)为纵标作图，应为一条直线,两条直线应基本重合，求出每秒钟消耗氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）的容积（ml），按下式计算。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　(2n<[1]>－n<[2]>)4000.f
　　　 每1mg 抑肽酶的效价(单位)＝───────────────
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 Ｗ

式中　4000为系数：
　　　Ｗ 为抑肽酶制成每1ml中约含1.67单位时的酶量，mg；
　　　n<[1]>为对照测定时每秒钟消耗的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)的容积，ml；
　　　n<[2]>为供试品溶液每秒钟消耗氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)的容积，ml；
　　　2 为供试品溶液中所加入胰蛋白酶的量为对照测定时的2倍；
　　　f为氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)校正因子。
　　效价单位定义　能抑制一个胰蛋白酶单位[每秒钟能水解1μmol的N－苯甲酰－L－精氨酸乙酯（BAEE）为一个胰蛋白酶单位(microkatal)]的活力称为一个抑肽酶活力单位（E.P.U）。
　　抑肽酶活性是测定对已知活性的胰蛋白酶的抑制作用。活力单位计算是采用胰蛋白酶原有活性与残存活性间的差值。

    【类别】　蛋白酶抑制药。

    【贮藏】　遮光，严封保存。

    【制剂】　注射用抑肽酶