拼音名：Xifu Baihou Yimiao
英文名：Diphtheria Vaccine，Adsorbed
书页号：2005年版三部-65
本品系用白喉杆菌，在适宜的培养基中培养产生的毒素经甲醛脱毒、精制，加入氢氧化铝佐剂制成。用于6个月～12岁的儿童预防白喉。
1 基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
2 制造
2.1 菌种
生产用菌种应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。
2.1.1 菌种名称
菌种为白喉杆菌PW8株或由PW8株筛选的产毒高、免疫力强的菌种。
2.1.2 种子批建立
应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。
2.1.3 种子批传代
主种子批自启开后传代不超过5代。
2.1.4 种子批菌种的检定
2.1.4.1 培养特性
在吕氏琼脂培养基上生长的菌落应呈灰白色、圆形突起、表面光滑、边缘整齐。在亚碲酸钾琼脂培养基上生长的菌落应呈灰黑色、具金属光泽。在血琼脂培养基上生长的菌落呈灰白色、不透明、不产生α溶血素。
2.1.4.2 染色镜检
革兰染色阳性，具异染颗粒；菌体呈一端或两端膨大、杆状，菌体排列呈栅栏状x形或Y形。
2.1.4.3 生化反应
发酵葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、糊精，均产酸不产气；不发酵蔗糖、甘露醇、乳糖、可溶性淀粉(附录ⅪV)。
2.1.4.4 特异性中和反应
接种在Elek’s琼脂培养基上，可见明显白色沉淀线。 2.1.5 种子批的保存
种子批应于2～8℃保存。
2.2 类毒素原液
2.2.1 毒素
2.2.1.1 生产用种子
工作种子批生产前应检查菌种的全部特性，合格后方可用于生产。由工作种子批传代于适宜的培养基，然后传代至产毒培养基种子管2～3代，再传至产毒培养基菌种瓶制成。
2.2.1.2培养基
采用胰酶牛肉消化液培养基或经批准的其他适宜培养基。
2.2.1.3 毒素制造过程中应严格控制杂菌污染，凡经镜检或纯菌试验发现污染者废弃。培养液经除菌过滤后，毒素效价应不低于150Lf/ml。
2.2.2 精制
2.2.2.1 可采用硫酸铵、活性炭二段盐析法或经批准的其他适宜方法精制。
2.2.2.2 透析过程可加适量防腐剂，有肉眼可见染菌者应废弃。
2.2.2.3 用同一菌种、培养基处方、精制方法制造的类毒素在同一容器内混合后除菌过滤者为一批。
2.2.3 脱毒
2.2.3.1 毒素或精制毒素中加入适量的甲醛溶液。置适宜温度进行脱毒。精制毒素亦可加适量赖氨酸后再加甲醛溶液脱毒。
2.2.3.2 脱毒检查
每瓶类毒素或精制类毒素取样，用灭菌生理氯化钠溶液分别稀释至100Lf/ml，用体重2.0kg左右的家兔2只，每只家兔分别皮内注射上述稀释样品各0.1ml及25倍稀释的锡克试验毒素0.1m1，另注射0.1m1灭菌生理氯化钠溶液作为阴性对照，于96小时判定结果。样品注射部位须无反应或仅有极微反应，锡克毒素反应须为阳性，阴性对照应无反应。
2.2.3.3 脱毒不完全者可继续脱毒，必要时可补加适量甲醛溶液。
2.2.3.4 精制类毒素可加0.1g/L硫柳汞为防腐剂，毒素精制法制造的精制类毒素未除游离甲醛者可免加防腐剂。
2.2.4 类毒素原液检定
按3.1项进行。
2.2.5 保存与有效期
于2～8℃避光保存。自脱毒试验合格之日起有效期为3年6个月。
2.3 半成品
2.3.1 佐剂配制
2.3.1.1 配制氢氧化铝可用三氯化铝加氨水法或三氯化铝加氢氧化钠法，用氨水配制时需透析除氨后使用。
2.3.1.2 配制成的氢氧化铝原液应为浅蓝色或乳白色的胶体悬液，不应含有凝块或异物。
2.3.1.3 氢氧化铝原液应测定氢氧化铝及氯化钠含量。
2.3.2 吸附类毒素的配制
2.3.2.1 含白喉类毒素30～50Lf/ml。
2.3.2.2 氢氧化铝含量应不高于3.0mg/ml。
2.3.2.3 可加0.05～0.1g/L的硫柳汞作为防腐剂。
2.3.2.4 加入氯化钠至7.5～9.5g/L。
2.3.3 半成品检定
按3.2项进行。
2.4 成品
2.4.1 分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.4.2 分装
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
2.4.3 规格
每瓶0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml。每1次人用剂量0.5ml，含白喉类毒素效价应不低于30IU。
2.4.4 包装
应符合“生物制品包装规程”规定。
3 检定
3.1 类毒素原液检定
3.1.1 pH值
应为6.4～7.4(附录V A)。
3.1.2 絮状单位(Lf)测定
依法检查(附录ⅪD)，应符合规定。
3.1.3 纯度
每lmg蛋白氮应不低于1500Lf。
3.1.4 无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
3.1.5 特异性毒性检查
每瓶原液取样，等量混合，用生理氯化钠溶液稀释成50Lf/ml，用体重250～350g豚鼠4只，每只腹侧皮下注射5ml，观察30天。前5日注意观察注射局部，第10天、第20天、第30天称体重。观察期间每只动物体重不得持续下降，到期每只动物体重应比注射前增加，注射局部无坏死，无连片脱皮、无脱毛，后期不得有麻痹症状。
3.1.6 毒性逆转试验
每瓶原液取样，用PBS(pH7.0～7.4)分别稀释至30～50Lf/ml，置37℃42天，用体重2.0kg左右的家兔2只，于每只家兔背部分别皮内注射上述稀释原液各0.1ml 及25倍稀释的锡克试验毒素0.1ml，另注射0.1ml PBS作为阴性对照，于72小时判定结果。原液注射部位红肿反应直径应不高于15mm，锡克毒素反应须为阳性，阴性对照应无反应。
3.2 半成品检定
无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
3.3 成品检定
3.3.1 鉴别试验
可选择下列一种方法进行：(1)疫苗注射动物应产生抗体(同3.3.4效价测定)；(2)疫苗加枸橼酸钠或碳酸钠将佐剂溶解后，做絮状试验(附录ⅪD)，应出现絮状反应；(3)疫苗经解聚液溶解佐剂后取上清，做凝胶免疫沉淀试验(附录ⅧC)，应出现免疫沉淀反应。
3.3.2 外观
振摇后为乳白色均匀悬液，无摇不散的凝块或异物。
3.3.3 化学检定
3.3.3.1 pH值
应为6.0～7.0(附录V A)。
3.3.3.2 氢氧化铝含量
应不高于3.0mg/m1(附录ⅦF)。
3.3.3.3 氯化钠含量
应为7.5～9.5g／L(附录ⅦG)。
3.3.3.4 硫柳汞含量
含量应不高于0.1g／L(附录ⅦB)。
3.3.3.5 游离甲醛含量
应不高于0.2g／L(附录ⅥL)。
3.3.4 效价测定
每1次人用剂量中白喉类毒素效价应不低于30lU(附录ⅪC)。
3.3.5 无菌检查
依法检查(附录Ⅻ A)，应符合规定。
3.3.6 特异性毒性检查
每亚批取样等量混合，用体重250～350g豚鼠4只，每只腹侧皮下注射2.5ml，观察30人，注射部位可有浸润，经5～10天变成硬结，30天可吸收不完全。在第10天、第20天、第30天称体量，到期每只豚鼠体重比注射前增加，无晚期麻痹症者为合格。
3.3.7 稳定性试验
生产工艺有改变时应做稳定性试验。抽3批连续批号的供试品，保存于2～8℃，在有效期末进行外观、pH值、特异性毒性及效价检定，应符合规定。
4 保存、运输及有效期
于2～8℃避光保存和运输。自分装之日起有效期为3年。
5 使用说明
吸附白喉疫苗使用说明
【药品名称】
通用名称：吸附白喉疫苗
英文名称：Diphtheria Vaccine，Adsorbed
汉语拼音：Xifu Baihou Yimiao
【成分和性状】本品系用白喉杆菌菌种，在适宜的培养基中产生的毒素经甲醛脱毒、精制，加入氢氧化铝佐剂制成。为乳白色均匀混悬液，长时间放置后佐剂下沉，溶液上层无色澄明，但经振摇后能均匀分散，含防腐剂。
【接种对象】6个月～12岁儿童。
【作用与用途】接种本疫苗后．可使机体产生体液免疫应答。用于6个月～12岁的儿童预防白喉。
【规格】每瓶0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml。每1次人用剂量0.5ml，含白喉类毒素效价应不低于30IU。
【用法用量】(1)上臂三角肌肌内注射。
(2)剂量如下：
项目 年份 针次 剂量／ml
第1年 第1针 0.5
全程免疫 (间隔4～8周)
第2针 0.5
第2年 注射1针 0.5
加强免疫 3～5年后 加强1针 0.5
【不良反应】注射本品局部可有红肿、疼痛、发痒，或有低热、疲倦、头痛等，一般不需处理即可消退。
【禁忌】(1)患严重疾病、发热者。
(2)有过敏史者。
(3)注射白喉类毒素后发生神经系统反应者。
【注意事项】(1)使用时应充分摇匀，如出现摇不散之凝块、异物、疫苗曾经冻结、疫苗瓶有裂纹或标签不清者，均不得使用。
(2)注射后局部可能有硬结，1～2个月即可吸收．注射第2针时应换另侧部位。
(3)应备有肾上腺素等药物，以备偶有发生严重过敏反应时急救用。接受注射者在注射后应在现场休息片刻。
(4)严禁冻结。
【贮藏】于2～8℃避光保存和运输。
【包装】
【有效期】3年。
【执行标准】
【批准文号】
【生产企业】
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