药典2000版-玻璃酸酶

时间：2009-10-28 |来源：三九中医药网 收集整理|点击：次


    拼音名：Bolisuanmei
    英文名：Hyaluronidase
    书页号：2000年版二部－443
    
　　本品系自哺乳动物睾丸中提取的一种能水解玻璃酸类黏多糖的酶。每1mg 的效价不得少于300 单位。

    【性状】　本品为白色或微黄色粉末；无臭。
　　本品在水中易溶，在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。

    【鉴别】　(1) 取本品，加磷酸盐缓冲液（附录Ⅻ C）制成每1ml 中含500 ～1000单位的溶液；在2 支试管中，各加上述溶液1ml ，取其中1 支加热煮沸，放冷，然后2支内各加玻璃酸钾贮备液（附录Ⅻ C）1ml ，摇匀，置37℃水浴中保温30分钟，取出，各加血清溶液（附录Ⅻ C）1ml ，摇匀，其中1 支未加热煮沸的溶液应较清。
　　(2) 取健康豚鼠1 只，分别于背部两处，皮内注射含0.25％亚甲蓝的氯化钠注射液0.1ml,作为对照，另两处皮内注射用上述溶液配成的每1ml 中含本品10单位的溶液0.1ml,四处须交叉排列，相互间的距离应大于 3cm，注射后 5分钟，杀死动物，将皮剥下，自反面观察亚甲蓝的扩散现象，供试品溶液所致的蓝色圈应大于对照所致的蓝色圈。

    【检查】　酸碱度　取本品，加水制成每1ml中含3mg的溶液，依法测定（附录Ⅵ H），pH值应为4.5 ～7.5 。

　　溶液的澄清度与颜色　取本品0.1g，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显色，与黄色 4号标准比色液（附录Ⅸ A第一法）比较，不得更深。

　　吸收度　取本品适量，加水制成每1ml 中含300 单位的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在280nm 波长处的吸收度不得大于0.6 ；在260nm 波长处的吸收度不得大于0.42。

　　酪氨酸　取甲、乙两支离心管，甲管中加供试品溶液（每1ml 中含玻璃酸酶5mg ）1ml ，乙管中加水1ml ，分别在105 ℃蒸发至干，各加6mol/L氢氧化钠溶液0.2ml ，以121 ℃饱和蒸汽加热3 小时或于水浴中加热4 ～5 小时，取出放冷，各加3.5mol/L硫酸溶液0.3ml ，甲管中加水1.5ml ，乙管中加酪氨酸对照品溶液〔每1ml 中含酪氨酸对照品30μg 的0.2mol/L硫酸溶液〕1.5ml ，然后各加含15％硫酸汞的2.5mol/L硫酸溶液1.5 ml，置水浴中加热10分钟，放冷至室温，加3.5mol/L硫酸溶液1ml 与0.2 ％亚硝酸钠溶液1ml ，摇匀，立即加水使成6ml ，摇匀，离心。自加水成6ml 起计时，20分钟后，吸取上清液，照分光光度法（附录Ⅳ A），在540nm 的波长处分别测定吸收度。每1单位含酪氨酸不得大于0.1 μg 。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　（Ｔ÷Ｓ）×45
　　酪氨酸含量（μｇ／单位）＝──────────────────
　　　　　　　　　　　　　　　　取样重量(mg)×每1mg 含有的单位

式中　Ｔ为供试品溶液的吸收度；
　　　Ｓ为酪氨酸对照品溶液的吸收度。

　　异常毒性　取体重17～22g 的健康小白鼠5 只，分别由皮下注射每1ml 中含玻璃酸酶10 000单位的氯化钠注射液0.25ml，48小时内不得发生皮下组织坏死或死亡现象，如有一只小白鼠发生组织坏死或死亡，应按上述方法复试，全部小白鼠在48小时内不得有组织坏死或死亡现象。

　　热原　取本品，加灭菌注射用水溶解制成每1ml 中含250 单位的溶液，依法检查（附录Ⅺ D），剂量按家兔体重每1kg 注射1ml ，应符合规定。

    【效价测定】　照玻璃酸酶测定法（附录Ⅻ C）测定，即得。

    【类别】　蛋白分解酶。

    【贮藏】　密闭，在阴凉干燥处保存。

    【制剂】　注射用玻璃酸酶