药典2000版-胰岛素

时间：2009-10-28 |来源：三九中医药网 收集整理|点击：次


    拼音名：Yidaosu
    英文名：Insulin
    书页号：2000年版二部－732
    
　　本品系自猪或牛胰中提取制得的具有降血糖作用的物质。按干燥品计算，每1mg的效价不得少于26单位。

    【性状】　本品为白色或类白色的结晶性粉末。
　　本品在水、乙醇、氯仿或乙醚中几乎不溶；在无机酸或氢氧化钠溶液中易溶。

    【鉴别】　(1) 取本品10mg，加用酸调节至pH值为2.5 ～3.0 的水6ml ，应能完全溶解；加碱调节pH值至5.1 ～5.3 后，即发生沉淀；再加酸使pH值成2.5 ～3.5 ，又完全溶解；加碱使pH值成8.0 ～8.5 ，仅显极微的浑浊。
　　(2) 取胰岛素（猪或牛）对照品及供试品适量，分别加0.01mol/L 盐酸溶液制成每1ml 中含40单位的溶液，照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(5μm)；柱温40℃；以0.1mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值为3.0 ）
－乙腈(73：27) 或适宜比例的混合液（含0.1mol/L硫酸钠）为流动相；检测波长为214nm ；流速为每分钟1ml 。取供试品溶液及对照品溶液各 5μl 注入液相色谱仪，记录主峰的保留时间，供试品的主峰保留时间应与同种属对照品的主峰保留时间一致。
　　(3) 取本品适量，加用酸调节至pH值为2.5 ～3.0 的水制成每1ml 中含5 单位的溶液。在20～30℃条件下，取体重20～24g 的小鼠5 只，按每20g体重皮下注射上述溶液0.25ml，注射后2 小时内，至少应有4 只小鼠发生惊厥。立即给惊厥的小鼠腹腔注射10％葡萄糖注射液1ml ，应能使惊厥停止。

    【检查】　吸收度　取本品，加0.01mol/L 盐酸溶液制成每1ml 中含0.5mg 的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在276nm 的波长处有最大吸收，吸收度为0.48～0.55。
　　有关蛋白质　取胰岛素标准品适量，精密称定，用尿素溶液（取尿素96g 、三羟甲基氨基甲烷1.5g与1mol/L盐酸溶液12ml，加水至200ml ）制成每100μl中含0.5μg(1)、1.0μg(2)、3.0μg(3)、5.0μg(4)及100μg(5) 的溶液。取供试品适量，精密称定，用上述尿素溶液制成每100μl中分别含100μg及500μg的溶液。照聚丙烯酰胺凝胶电泳法（附录Ⅴ F）测定，胶条染色后，目测比较各色带的颜色。(1) 应有明显可见的色带；(1) ～(4) 色带应呈明显的梯度，否则应重新试验。100μg和 500μg 供试品管，主带位置应与(5) 的主带位置一致； 100μg 供试品管与(5) 管中相应的主带后泳动较快的一条色带，颜色不得深于(3) ；500μg供试品管与(5)管中相应的主带后泳动较慢的一条色带，颜色不得深于(1) 。
　　大分子蛋白质　取供试品约100mg ，精密称定，用1mol/L醋酸溶液制成每1ml 中含50mg的溶液。照柱色谱法（附录Ⅴ C），取葡聚糖凝胶Ｇ－50（超细型）约50g ；色谱柱长80cm、内径2cm ；洗脱剂为1mol/L醋酸溶液；检测波长为280nm ；流速每小时22～25ml；供试品溶液加入量为0.6ml 。主峰前洗脱的面积之和应不大于所有洗脱峰总面积的1％。
　　氮　取本品约10mg，精密称定，照氮测定法（附录Ⅶ D第二法）测定，按干燥品计算，含氮量应为14.5％～16.0％。
　　干燥失重　取本品约0.2g，精密称定，在105 ℃干燥至恒重，减失重量不得过10.0％（附录Ⅷ L）。
　　锌　取供试品适量（约相当于40单位）与标准锌溶液（精密称取硫酸锌44mg，置100ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置另一100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，每1ml 相当于10μg 的Zn）1.6ml ，分别置10ml量瓶中，各加硼酸氯化钾缓冲液(pH9.0)2ml与新制的锌试剂溶液（取锌试剂0.13g ，加氢氧化钠试液2ml 溶解后，加水使成100ml）1ml ，用水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，照分光光度法（附录Ⅳ A），在620nm 的波长处分别测定吸收度，计算每1000单位中的含锌量，不得过 0.4mg。

    【效价测定】　照胰岛素生物检定法（附录Ⅻ G）测定，应符合规定。测得的结果应为标示量的91％～110 ％。

    【类别】　降血糖药。

    【贮藏】　避光，密闭，在 -15℃以下保存。

    【制剂】　(1) 中性胰岛素注射液　 (2) 精蛋白锌胰岛素注射液