拼音名：Liugan Quanbingdu Miehuoyimiao
英文名：lnfluenza Vaccine(Whole ViriOn)， Inactivated
书页号：2005年版三部-112
本品系用WHO推荐的并经国家食品药品监督管理局批准的甲型和乙型流行性感冒(简称流感)病毒株分别接种鸡胚，经培养、收获病毒液、灭活病毒、浓缩和纯化后制成。用于预防流行性感冒。
1 基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。
2 制造
2.1 生产用鸡胚
毒种传代和制备用鸡胚应来源于SPF鸡群；疫苗生产用鸡胚应来源于封闭式房舍内饲养的健康鸡群，并选用9～11日龄无畸形、血管清晰、活动的鸡胚。
2.2 毒种
2.2.1 名称和来源
生产用毒种为WHO推荐并经批准的甲型和乙型流行性感冒病毒株，经检定证明为当前流行的病毒株或相似株。
2.2.2 种子批的建立
应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。各种子批传代应不超过批准的代次。
2.2.3 种子批毒种的检定
主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行2.2.3.1～2.2.3.4项检定。
2.2.3.1 鉴别试验
血凝素型别鉴定：应用相应(亚)型特异性免疫血清进行血凝抑制试验，结果应证明其抗原性与推荐的病毒株相一致。
2.2.3.2 病毒血凝滴度
采用血凝法检测，血凝效价应不低于1:120。
2.2.3.3 无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
2.2.3.4 支原体检查
依法检查(附录ⅫB)，应符合规定。
2.2.3.5 外源性禽白血病病毒检测
用相应(亚)型的抗流感病毒血清中和毒种后，接种SPF鸡胚细胞，经培养，用酶联免疫法检测培养物，结果应为阴性。
2.2.3.6 外源性禽腺病毒检测
用相应(亚)型的抗流感病毒血清中和毒种后，接种SPF鸡胚肝细胞，经培养．分别用适宜的血清学方法检测其培养物中的I型和Ⅲ型禽腺病毒，结果均应阴性。
2.2.4毒种保存
冻干毒种应置-20℃以下保存，液体毒种应于一60℃以下保存。
2.3 单价原液
2.3.1 病毒接种和培养
于鸡胚尿囊腔接种经适当稀释的工作种子批毒种后，置33～35℃培养48～72小时。 一次未使用完的工作种子批毒种，不得再回冻继续使用。
2.3.2 病毒收获
筛选活鸡胚，置2～8℃一定时间冷胚后，分组收获尿囊液，即为单次收获物。
2.3.3 合并
单型毒种的单次收获物可合并为单价病毒合并液。
2.3.4 病毒灭活
加入适宜浓度的甲醛溶液至单价病毒合并液中，置2～8℃病毒灭活7～10天。
2.3.5 浓缩和纯化
2.3.5.1 浓缩
超滤浓缩灭活的单价病毒合并液，浓缩后的病毒液血凝效价应不低于1：10240。
2.3.5.2 纯化
超滤浓缩后的病毒液可采用柱色谱法或蔗糖密度区带离心法进行纯化，采用后一种方法进行纯化的应用超滤法去除蔗糖，纯化后的病毒液经除菌过滤，即为单价原液。
2.3.6 保存
单价原液应置2～8℃保存。
2.3.7 单价原液检定
按3.1项进行。
2.4 半成品
2.4.1 配制
根据各单价病毒原液血凝素滴度，分别按比例混合后，进行适当稀释，加入硫柳汞作为防腐剂，即为疫苗半成品。
2.4.2 半成品检定
按3.2项进行。
2.5 成品
2.5.1 分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.5.2 分装
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
2.5.3 规格
每瓶0.5ml、1.0ml。每1次人用剂量为0.5ml、1.0ml，含各流感病毒株血凝素应不低于15μg。
2.5.4 包装
应符合“生物制品包装规程”规定。
3 检定
3.1 单价原液检定
3.1.1 鉴别试验
用相应(亚)型特异性免疫血清进行血凝抑制试验或单向免疫扩散试验(方法见3.1.3项)，结果证明抗原性与推荐病毒株相一致。
3.1.2 病毒灭活验证试验
将原倍及10〈-1〉倍、10〈2〉倍稀释的病毒液分组接种鸡胚尿囊腔，每组接种lO个9～11日龄鸡胚，每胚接种0.2ml，置33～35℃培养72小时。24小时内死亡的不计数，每组鸡胚须至少存活80％。自存活的鸡胚中每胚取0.5ml尿囊液，按组混合后，再盲传一代，每组各接种10个胚，每胚接种0.2ml，经33～35℃培育72小时后，取尿囊液进行血凝试验，结果应不出现血凝反应(该项检测亦可在单价病毒合并液灭活后进行)。
3.1.3 血凝素含量
采用单向免疫扩散试验检测血凝素含量。 将标准抗原和原液分别加入到含有标准抗体的1.5％琼脂糖凝胶板上，孔径为3mm，每孔10μl，20～25℃放置至少18小时左右。用PBS浸泡1小时后，干燥、染色、脱色。准确测量标准抗原和原液形成的沉淀环直径，以标准抗原形成的沉淀环的直径对其相应抗原浓度进行直线回归，求出直线回归方程，代入原液的沉淀环直径，即可得到原液的血凝素含量，应不低于90μg／(株•m1)。
3.1.4 无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
3.2 半成品检定
3.2.1 游离甲醛含量
应不高于50μg／剂(附录ⅥL)。
3.2.2 硫柳汞含量
应不高于50μg／剂(附录ⅦB)。
3.2.3 血凝素含量
按3.1.3项进行，血凝素含量应不低于15μg／(株•剂)。
3.2.4 无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
3.3 成品检定
3.3.1 鉴别试验
用相应(亚)型特异性免疫血清进行单向免疫扩散试验，结果应证明抗原性与推荐病毒株相一致。
3.3.2 外观
应为微乳白色液体，无异物。
3.3.3 装量
按附录I A中装量项进行，应不低于标示量。
3.3.4 化学检定
3.3.4.1 pH值
应为6.8～8.0(附录V A)。
3.3.4.2 硫柳汞含量
应不高于50μg/剂(附录ⅦB)。
3.3.4.3 总蛋白质含量
应不高于300μg／剂(附录ⅥB第二法)，并不得超过疫苗中血凝素含量的6倍。
3.3.5 血凝素含量
按3.1.3项进行，血凝素含量应不低于15μg／(株•剂)。
3.3.6 卵清蛋白含量
采用酶联免疫法(仲裁方法)或对流免疫电泳方法检测，卵清蛋白含量应不高于1000ng/剂。
3.3.7 无菌检查
依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。
3.3.8 异常毒性检查
依法检查(附录ⅫF)，应符合规定。
3.3.9 细菌内毒素检查
应不高于100EU/剂(附录ⅫE凝胶限量试验)。
4 保存、运输及有效期
于2～8℃避光保存和运输。自血凝素含量检定合格之日起，有效期为1年。
5 使用说明
流感全病毒火活疫苗使用说明
【药品名称】
通用名称：流感全病毒灭活疫苗
英文名称：Influenza Vaccine(Whole Virion)，Inactivated
汉语拼音：Liugan Quanbingdu Miehuoyimiao
【成分和性状】本品系用甲型和乙型流行性感冒病毒当年的流行株或相似株，分别接种鸡胚，经培养、收获病毒液、灭活、浓缩、纯化后制成。为微乳白色液体，含硫柳汞防腐剂。
【接种对象】12岁以上儿童、成人及老年人。
【作用与用途】接种本疫苗后，可刺激机体产生抗流行性感冒病毒的免疫力。用于预防流行性感冒。
【规格】每瓶0.5ml、1.0ml。每1次人用剂量为0.5ml、1.0ml，含各流感病毒株血凝素应不低于15μg。
【用法用量】于上臂外侧三角肌肌内注射，注射剂量为0.5ml或1.0ml。
【不良反应】少数人注射后12～24小时注射部位出现红、肿、痛、触痛和痒等， 一般可很快消失，不影响正常活动。少数人出现肌肉疼痛、关节疼痛、头痛、不适和发热等全身反应。过敏反应一般出现于对鸡蛋蛋白过敏者。
【禁忌】(1)发热、患急性疾病及感冒者。
(2)有格林巴利综合征病史者。
(3)对鸡蛋过敏或有其他过敏史者。
(4)妊娠期妇女。
【注意事项】(1)严禁静脉注射!
(2)注射后出现任何神经系统反应者，禁止再次使用。
(3)疫苗中有异物、有摇不散的沉淀，疫苗瓶有裂纹或标签不清者，均不得使用。
(4)应备有肾上腺素等药物，以备偶有发生严重过敏反应时急救用。接受注射者在注射后应在现场休息片刻。
(5)严禁冻结。
【贮藏】于2～8℃避光保存和运输。
【包装】
【有效期】1年。
【执行标准】
【批准文号】
【生产企业】
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